phaser(phASER 计算等位基因表达)
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phASER 计算等位基因表达
等位基因的特定表达(allele specific expression,ASE)数据是后续分多分析的基础。利用它可以识别印记基因、研究蛋白截断变异以及用于量化顺式(cis)调控遗传变异的影响。虽然下游的分析具有多种形式,但是第一步总是要获得ASE数据。在最基本的层面上,ASE数据由RNA-seq读到的杂合子SNP位点生成,根据它们的序列可以对reads进行分型。但是一般情况下,不使用indel型变异,因为indel周围干扰数据的正确比对。 这里整理工具phASER(phasing and ASE fromRNA-seq)的具体用法,这个软件可以获得等位基因全部单倍型的可靠表达水平。 软件的作者认识 这是产生ASE数据的黄金标准,并且获得的数据可以用于任何感兴趣的下游分析。 phASER 运行于Python 2.7.x 并依赖下列包: SciPy , NumPy , samtools , tabix , bedtools , Cython 随后对软件进行解压 phASER 需要VCF文件和比对的bam文件。 注意:phASER是利用VCF文件中的杂合位点计算等位基因表达水平。 首先VCF需要压缩和建立索引 bam文件需要建立索引 如果bam文件是STAR产生的,mapq选255;如果bam文件是hisat2产生的,mapq选60。sampleID由call SNP之前的AddOrReplaceReadGroups 决定。 --threads N 线程数,但是phASER对多线程优化不好,使用多线程以后,很容易出报错。 prefix_output是输出文件的前缀,需要注意的是输出文件较多,为了防止文件混乱,最好每个样本输出到一个目录下。 --temp_dir ./tmp 为了防止系统没有空间储存临时文件,最好指定临时文件的位置。 --id_separator默认的分隔符是下划线 ‘_’ , 如果基因组scaffold的命子中包含下划线,这里要重新指定。 --output_read_ids 输出单倍型的reads ID,这个参数默认是0。reads ID的结果在haplotypic_counts.txt 这个文件里。 如果软件运行成功,最后会有类似信息 --haplotypic_counts 入读的文件是上步产生的 prefix.haplotypic_counts.txt --features 为基因bed注释,这里要求要有基因名,染色体名和之前bam、vcf中的一定要一致。 结果文件如下:aCount 和 bCount 列是唯一比对到单倍型的reads数,可用于下游分析。 aCount 对应vcf中ref单倍型,bCount对应vcf中alt单倍型。
phaser学习总结之phaser入门教程
最近公司做项目的时候正好使用到phaser,在这里做一下自己整理出来的一些心得,方便大家参考,phaser这一个游戏引擎通常是做2d游戏的,入门也非常简单,只需你会一点的javascript,但是你想做一个比较完美的游戏的话,那么光靠一点点的javascript是远远不够的,本篇博客将快速带你入门phaser。 phaser是一款快速,免费及开源HTML5游戏框架,它支持WebGL和Canvas两种渲染模式,可以在任何web浏览器环境下运行,游戏可以通过第三方工具转为iOS、Android 支持的 Native APP,允许使用 JavaScript 和 TypeScript 进行开发。 phaser中的一切都是从Game类开始,所以我们暂时将Game类当作phaser的中心吧!当你new了一个Game之后,game中的很多属性就有了,phaser的核心可以用如下这张图表示。 这里我们经常使用的对象有load,time,world,input,camera。 在开发中,我们经常使用方式五创建phaser对象,当然你也可以根据自己的喜好选择,就看你是喜欢函数创建还是对象创建。 画布宽度,数字或字符串类型可选参数,默认为800,如果以字符串的形式给出,该值必须在0到100之间,为百分比,如果没有指定父容器,则默认为浏览器窗口 画布高度 指定渲染机制,值可以是Phaser.WebGL,Phaser.Canvas,Phaser.AUTO(自动尝试使用WebGL,如果浏览器或设备不支持,使用canvas)或者Phaser.HEADLESS(不进行渲染) 想插入游戏画布的DOM元素,画布的父元素,可选值为DOM本身或者是id,如果为空字符串,画布将被插入到body元素中 默认的状态对象,对象类型,可以是null,也可以是Phaser.state函数(初始化,预加载,创建,更新,渲染) 画布背景是否透明,布尔值,默认为fa
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